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北京六一生物科技有限公司

  • 聯(lián)系人:王經(jīng)理
  • 官網(wǎng)地址:www.ly.com.cn
  • 經(jīng)營(yíng)模式:制造商
  • 主營(yíng)產(chǎn)品:非醫(yī)用基因擴(kuò)增儀,ED觀察儀,藍(lán)光源觀察儀,凝膠成像系統(tǒng),凝膠成像分析系統(tǒng)
  • 所在地:北京市房山區(qū)閻富路69號(hào)院25號(hào)樓1至4層101,1至4層102
  • 供應(yīng)產(chǎn)品:25
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基因擴(kuò)增儀的工作原理是什么?

發(fā)布時(shí)間:2022-07-01

  基因擴(kuò)增儀的工作原理  基因擴(kuò)增儀是利用PCR技術(shù)對(duì)特定基因做體外的大量合成,用于以檢測(cè)DNA/RNA為目的的各種基因分析。  基因擴(kuò)增儀的PCR反應(yīng)一般設(shè)置20~40次循環(huán),每一循環(huán)包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三步反應(yīng)。每一循環(huán)的產(chǎn)物作為下一個(gè)循環(huán)的模板。PCR的擴(kuò)增效率很高,如果循環(huán)次數(shù)是30次,那么新生DNA 片段理論上達(dá)到230拷貝(約為109個(gè)分子)。PCR反應(yīng)每個(gè)循環(huán)的三個(gè)基本反應(yīng)步驟如下:  ① 模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA產(chǎn)物解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;  ② 模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;  ③ 引物的延伸:溫度升到72℃左右,DNA模板-引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。重復(fù)循環(huán)變性-退火-延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成

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